檢測認證人脈交流通訊錄
- ATCC細胞的注意事項:凍存的細胞株和雜交瘤細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細胞后,可以立即解凍復蘇,去除二甲基亞砜(DMSO)后進行細胞培養。如果不立即復蘇培養細胞,必須將細胞凍存管放置于液氮罐存儲。請不要將細胞存儲在-130℃以上的溫度。如果溫度不夠低,達不到-130℃,細胞活力會迅速下降。
操作推薦:ATCC推薦在操作凍存的細胞株時使用手套,工作服和防護面具以避免任何事故發生。檢查包裝,查看是否有任何破裂或滲漏。凍存的細胞株應處于固體狀。將凍存的細胞株從有干冰的包裝中取出,立即復蘇培養,或迅速轉移放置在液氮罐存儲。
ATCC細胞凍存的復蘇和培養
1.先準備好細胞培養皿或細胞培養瓶,及產品說明推薦的相應細胞培養基。并在37℃水浴中預先溫熱細胞培養基。
2.小心取出裝有細胞的凍存管,保持管蓋擰緊,將凍存管蓋以下的部分置于37℃水浴中并輕微的晃動以幫助解凍。解凍過程應該盡快,大約短于2分鐘或待最后一塊小冰晶體剛融化,就應將細胞凍存管取出水浴。
3.在從水浴中取出的細胞凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑,用無菌紙巾或紗布試干。之后的操作步驟都應該遵循在無菌條件下生物安全柜中嚴格操作。
4.小心擰開凍存管的頂部,將管內容物用1ml移液槍轉移到含9毫升培養基的無菌離心管中。離心5到7分鐘(125×g),小心吸去上清液以去除抗凍劑(二甲基亞砜),避免丟失細胞沉淀。將細胞沉淀重懸于配好的完全培養基中。將細胞懸液轉移到培養容器,輕輕搖晃使細胞均勻的分布。生長較慢的細胞株可重懸于5-8ml培養基并轉移到T25培養瓶。生長較快的細胞株可重懸于12-20ml培養基并轉移到T75培養瓶。ATCC網站有各個細胞株的具體生長狀況及培養方法記載。
ATCC細胞https://www.chem17.com/st503054/erlist_2296127.html
https://www.chem17.com/st503054/product_36377161.html