檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 變性梯度凝膠電泳法(denaturing gradient gel electrophoresis,DGE)分析PCR產(chǎn)物,如果突變發(fā)生在最先解鏈的DNA區(qū)域,檢出率可達(dá)100%,檢測片段可達(dá)1kb,最適圍為100bp-500bp。基本原理基于當(dāng)雙鏈DNA在變性梯度凝膠中進(jìn)行到與DNA變性溫度一致的凝膠位置時,DNA發(fā)生部分解鏈,電泳遷移率下降,當(dāng)解鏈的DNA鏈中有一個堿基改變時,會在不同的時間發(fā)生解鏈,因影響電泳速度變化的程度而被分離。由于變性梯度凝膠電泳法是利用溫度和梯度凝膠遷移率來檢測,需要一套專用的電泳裝置,合成的PCR引物最好在5`末端加一段40bp-50bp的GC夾,以利于檢測發(fā)生于高熔點(diǎn)區(qū)的突變。
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陳韜澤
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