檢測認證人脈交流通訊錄
- 【產品簡介】
沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）是一種腎上腺受體激動劑即神經興奮劑。此類藥品在臨床上用于治療支氣管哮喘、慢性支氣管炎和肺氣腫等疾病，因此藥可以提高瘦肉率，減少脂肪沉積和促進動物生長，被一些畜牧養殖企業作為養殖促進劑非法使用。其殘留量可導致人體肌肉震顫、心悸、神經過敏、頭痛、目眩、惡心、嘔吐、發燒、戰栗等癥狀，對消費者的健康極有危害，現已被明令禁止用于養殖業。
【測定原理】
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測豬肉等樣本中的沙丁胺醇，在微孔條上預包被上偶聯抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的原理來進行的，樣本中的沙丁胺醇和微孔條上預包被偶聯抗原競爭抗沙丁胺醇抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣品中的沙丁胺醇含量與樣品的吸光度值呈反比，與標準曲線比較即可得出沙丁胺醇含量。
【試劑盒技術指標】
規 格：96孔/盒
靈 敏 度： 0.1ppb
檢測時間： 45min
樣本檢測下限：
尿 樣 ………………………………… 0.1ppb
組 織（處理法一）…………………… 0.4ppb
肉樣本（處理法二）…………………… 0.1ppb
飼 料 …… …………………………… 1ppb
交叉反應率：
沙丁胺醇（Salbutamol ）………………… 100%
克倫特羅（Clenbuterol）………………… <0.1%
萊克多巴胺（Ractopamine）……………… <0.1%
多巴酚丁胺（dobutamine）……………… <0.1%
樣本回收率：
尿 樣 ……………………… 95%±10%
組 織 ……………………… 85%±15%
飼 料 ……………………… 85%±15%
【試劑盒組成】
1、 微量測試孔：1×96孔板（12條×8孔）
2、 （Clenbuterol標準溶液X6瓶：（1ml/瓶）0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
3、 酶標記抗體工作液 10ml………………綠色帽
4、 底物A液 7ml ……………………白色帽
5、 底物B液 7ml ……………………黑色帽
6、 終 止 液 7ml ……………………黃色帽
7、 20X濃縮洗滌液40 ml ………………透明帽
【 所用儀器、試劑】
具備的儀器：微孔酶標儀、氮氣吹干裝置、打印機、均質器 、振蕩器、離心機、恒溫箱、天平（感量0.01g）、刻度移液管
微量移液器：單道20μl-200μl、100μl-1000μl、多道 250μl
試 劑： 乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、乙腈、氫氧化鈉、甲醇、無水硫酸鈉
【樣本前處理步驟】
樣本處理前須知
處理任何樣本時，都必須注意：
（a）實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
（c）實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實驗結果。
樣本前處理需配制：
配液1、0.1M HCl 溶液
取0.86ml濃HCl加水定溶至100ml。
配液2、0.1M NaOH 溶液
稱取0.4g NaOH加水定溶至100ml。
配液3、乙腈-0.1M HCl 溶液
V乙腈：VHCl =84：16
（a）尿樣本的處理方法
取20μl清亮尿樣直接測定（如果尿樣渾濁一定要過濾或離心10min，4000r/min，直至得到清亮尿樣），暫不使用的樣本應冷凍保存。
樣本稀釋倍數：1
（b）組織樣本的處理方法一
1、 稱2±0.05g組織，加入6ml去離子水，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min(注：若組織樣本中油脂含量較高，可在振蕩后放入85℃水浴10min后再離心)。
2、 取20μl上清液進行分析。
樣本稀釋倍數：4
（c）組織樣本的處理方法二
1、 稱取2 ±0.05g的組織，加入6ml乙腈-0.1MHCl，振蕩2min,室溫4000r/min以上離心10min。
2、 取上清3ml，加入2ml 0.1M NaOH，加入6ml乙酸乙酯，振蕩1min，室溫4000r/min 以上離心10min。取全部上清于50℃氮氣或空氣吹干。
3、 加1ml三蒸水復溶，混合30s，取20μl進行分析。
樣本稀釋倍數：1
（d）飼料樣品的處理方法
1. 稱1.0±0.05g研碎的飼料樣品，加入10ml甲醇，再加入5g無水硫酸鈉，放振蕩器上振蕩2min；15℃ 4000r/min以上離心10min；
2. 吸出離心后的上清液1ml，于56℃氮氣吹干，用1 ml 去離子水溶解干燥的殘留物，再加入1mL正己烷混合30s ；15℃ 4000r/min以上離心5min。
3. 取20μl下層進行分析。
樣本稀釋倍數：10
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