檢測認證人脈交流通訊錄
- 上海卓康以質量為本，樹立“卓康質量”是公司的發展目標。我們一直加倍努力，竭盡全力做到不辜負您的支持與信賴。同時公司也離不開廣大客戶的幫助支持，真誠邀請國內外有實力的實驗室、生物技術公司合作，共同發展。
目前卓康提供的服務范圍包括：生物合成siRNA、shRNA的制備；轉錄編碼shRNA的DNAs、轉錄編碼shRNA的質粒載體訂購；siRNA靶位的設計和實驗選擇分析；siRNA相關試劑和RNA技術相關產品的代理銷售；重組病毒構建包裝；基因蛋白表達、載體構建、多克隆抗體和單克隆抗體制備；多種細胞學服務；常用的分子生物學試劑、實驗儀器、實驗耗材銷售等。
卓康在分子生物學和免疫學實驗技術，特別抗體制備技術方面同樣具有豐富經驗，提供快速、優質、性價比高的實驗服務。
代做實驗――MTT實驗服務
技術原理：
MTT比色法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5-二甲基噻唑-2) –2，5-二苯基四氮唑嗅鹽，商品名為噻唑藍，簡稱MTT 。檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原成為難溶性的藍紫色結晶物甲臢（formazan）并沉積在細胞中，而死去的細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臢，利用酶聯免疫檢測儀測定490 nm波長處的光密度OD值，可以間接反映出活細胞數量。在一定范圍內，MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。該方法已經廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測，大規模的抗腫瘤藥物篩選，細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。
服務內容:
我們多用與轉染目的載體后MTT檢測細胞增值：通用設置時間點12h，24h，36h，48h，72h（時間點也可由客戶定）
組別設置：正常組，HK陰性對照組（主要是用來消除轉染試劑毒性的影響），目的載體組
實驗步驟：
1：接種細胞：接種細胞:用0.25%胰酶消化單層培養細胞,用完全培養液配成單層培養細胞懸液，以每孔103-104個細胞接種于96孔板中，每孔200vl；37度Co2箱陪養24h。
2:培養細胞：轉染目的載體后同一般培養條件，培養3－5天（可根據試驗目的和要求決定培養時間）。
3：呈色：培養3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS <ph=7.4>配）20ul.
繼續孵育4小時，終止培養，小心吸棄孔內培養上清液，對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結晶物充分融解。
4：比色：選擇490nm波長，在酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值，記錄結果，以時間為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制細胞生長曲線。
注意事項：
（1）選擇適當的細胞接種濃度。
（2）避免血清干擾：一般選小于10％的胎牛血清的培養液進行試驗。在呈色后盡量吸盡孔內殘余培養液。
（3）設空白對照：與試驗平行不加細胞只加培養液的空白對照。其他試驗步驟保持一致，最后比色以空白調零。
服務承諾:
1． 提供每組平均OD值詳細記錄
2． 由OD值繪制生長曲線及結果分析
服務價格：
具體價格根據客戶實驗而定
聯系電話：021－55660344，021－55063976
傳真：021－55063976
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