檢測認證人脈交流通訊錄
- 兔抗鼠IgG血清
試劑及配制
1、緩沖生理鹽水：
（ 1） 貯存液： Na2HPO4.12H2O 2.85g
KH2PO4 0.27g
NaCl 17.00g
蒸餾水定容至 100ml
4℃保存備用
（ 2）應用液： 5ml 貯存液加 95ml 蒸餾水，再加 10%硫酸鎂 0.1ml， 當日配制， 12 小時內使用。
2、2%綿羊紅細胞：無菌采取綿羊血液，于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以緩沖液洗 3次，并配成 2%細胞懸液。必要時可用吸光光度法或細胞計數法使懸液細胞濃度標準化。
3、溶血素：將綿羊紅細胞溶血素（效價 1:4000），用應用液做 1:2000 倍稀釋（即 1ml 溶血素加 1999ml 應用液）。
4、待測血清：新鮮血液室溫放置 30min，再 4℃放置 60min，使血塊收縮， 4℃離心（ 3000r/min）10min，取上清， -20℃保存。
兔抗鼠IgG血清
小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?
來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意：血清應保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。
兔抗鼠IgG血清
標本要求
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。
5.培養細胞:
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
