檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
篤瑪 雞蛋白聚糖(PG) ELISA 試劑盒 產(chǎn)品說明書
- 雞蛋白聚糖(PG) ELISA 試劑盒
ELISA的樣本實驗準(zhǔn)備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,最好-71℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本 />答:離心保存,檢驗要求,就是標(biāo)本標(biāo)號,和特殊要求
問:測好多指標(biāo) 血清不分開可以么?
答:要分開,分好后,分別標(biāo)上序列號,便于實驗好區(qū)分。
雞蛋白聚糖(PG) ELISA 試劑盒
樣品測定
1. 移取xx微升 去干擾液(Reagent C)到上述待測樣品或標(biāo)準(zhǔn)樣品管里,混勻
2. 加入xx微升 反應(yīng)液(Reagent D)
3. 加入xx微升 顯色液(Reagent E),混勻
4. 室溫下孵育20分鐘
5. 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心3分鐘,速度為5000g
6. 移取1毫升上清液到比色皿
7. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,獲得待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品讀數(shù)
雞蛋白聚糖(PG) ELISA 試劑盒
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
500ng/L 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250ng/L 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125ng/L 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
62.5ng/L 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
31.25ng/L 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍(48T的20倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。