檢測認證人脈交流通訊錄
倉鼠脂聯素含C1Q和膠原域(adipoq)ELISA試劑盒
- 上海篤瑪生物科技有限公司代理的品牌:試劑:Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物試劑及耗材:R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等
倉鼠脂聯素含C1Q和膠原域(adipoq)ELISA試劑盒
試劑盒組成:48孔/96孔
保存:2-8℃
主要用途:科研檢測
檢測原理:ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術.
種屬包括:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等等
規格:48T/96T(可提供定性定量)
篤瑪生物實驗操作步驟:倉鼠脂聯素含C1Q和膠原域(adipoq)ELISA試劑盒
取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
分組:取出96孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul 加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復5 次,拍干。
加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙徹底拍干。
顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
終止:25-37℃下避光反應10-15分鐘,加入50ul終止液。
讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內,以免影響準確性。
數據計算:倉鼠脂聯素含C1Q和膠原域(adipoq)ELISA試劑盒
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
注意事項:倉鼠脂聯素含C1Q和膠原域(adipoq)ELISA試劑盒
實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性。
孵育:嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商聯系,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
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