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PKC活性操作步驟

　　PKC活性操作步驟: 　　1.用預(yù)冷的勻漿器把細(xì)胞勻漿。　　2.在4°C，用14,000 xg離心裂解液5分鐘，保存上清。　　3.用PKC抽提液預(yù)平衡1ml的DEAE纖維素柱，再把第2步中得到的上清過柱。用5m的PKC抽提液洗柱子，然后用5ml含有200mM NaCI的PKC抽提液洗脫含有PKC的組分。　　4.用PKC稀釋液(PKC dilution buffer)將少量蛋白激酶C (Promtein Kinase C)稀釋到2 .5ug/ml.隨試劑盒所附的產(chǎn)品信息中標(biāo)有這個(gè)酶的初始濃度。　　5.用探頭超聲波破碎儀超聲處理PKC Activator Solution 20-30秒,或直到溶液變溫暖。　　6.對(duì)每一個(gè)樣品，按照下面所列順序在0.5ml小離心管中混合PepTag@ PKC 5x Buffer,PepTag@ C1Peptide,超聲過的PKC Activator 5X Solution,和水。在樣品加入之前，小離心管--直要放在冰上。陰性對(duì)照將用于對(duì)反應(yīng)進(jìn)行定量時(shí)確定其摩爾吸收值(說明書第IV部分) 。　　更多產(chǎn)品信息訪問杭州研謹(jǐn)生物科技有限公司　　https://www.chem17.com/st519722/product_36834909.html 　　http://www.yanjinbio.cc/Products-36834909.html

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