檢測認證人脈交流通訊錄
- 人ELISA試劑盒檢測程序:
1、微孔板使用前洗板2次，向濾紙印干后，請立即使用。
2、加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板混勻后置37℃，90分鐘,然后甩去酶標板內液體，向濾紙上印干，不洗板。
3、每孔加入1×的生物su化抗體工作液100ul，混勻后置37℃，60分鐘。
4、洗板：用洗滌液將微孔板充分洗滌3次，向濾紙上印干。
5、每孔加入1×的ABC復合物工作液100ul，混勻后置37℃，30分鐘。
6、洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌5次，向濾紙上印干。
7、每孔加入底物工作液90ul，混勻后置37 ℃暗處反應3-20分鐘（具體顯色時間根據顯色結果而定）。
8、每孔加入50ul終止液，混勻，30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
人ELISA試劑盒結果判斷與計算：
1、所有OD值建議減除空白值后再行計算，如空白OD低于0.1，也可以直接計算。
2、以標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標，手工繪制或用軟件繪制標準曲線，根據樣品OD值計算出相應含量，再乘上稀釋倍數即可。
注意事項:
1、在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測，每次檢測都應做標準曲線。
2、洗滌過程很關鍵，洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高，從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能 有結晶,屬于正常現象，37℃水浴使結晶完全溶解后再配制洗滌液。
3、檢測時所有試劑都要恢復到室溫，板條開封后剩余板條需封好，放回袋中2 個月內用完。
4、試劑盒使用超敏TMB溶液，若顯色過深會出現絮狀物，屬正常現象，不影響結果判讀。
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