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腫瘤細胞系

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    •   腫瘤細胞系培養:   一、貼壁細胞   1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;   2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,*次傳代比例為1:2。   3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為消化時間,記錄消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之完全脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入完全培養基重懸細胞,進行傳代。   二、懸浮細胞   1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;   2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);   3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,*次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。   腫瘤細胞系   http://www.qainnuosw.cn/SonList-1775647.html   https://www.chem17.com/st373154/erlist_1775647.html
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