HPLC：

服務簡介

高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography -- HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。

本臺高效液相色譜（HPLC）LC-20A在充實基本性能的同時，確立了高度對應網絡要求的綜合管理系統，一元化管理數據與裝置，實現了分析的高效率

服務參數

本臺高效液相色譜輸液單元， Prominence 20AT，

輸液方式：串聯雙柱塞；

梯度系統，梯度方式：低壓混合 ，混合溶劑數：最多4液；

紫外可見檢測器 ，光源： D2燈；

自動進樣器 Prominence SIL-20A。

檢測項目

高效液相色譜（HPLC）用于有機物的定量。

樣品要求

可根據實際樣品提供具體的樣品前處理方案。

結果示例

1、乙二醇含量測試

2、18種氨基酸含量測試

常見問題及解答

1. 測試高效液相為什么需要先和測試經理溝通？

HPLC可選因素太多，檢測器條件，色譜柱條件，流動相條件都可以改變出峰時間。

2. 測試為什么需要標準品？

無論是定性還是定量都需要用標準品來鑒別，作為標準來衡量。

3. 沒有任何信息可以做HPLC嗎？

可以的，這就是涉及了方法開發，耗時會久一點。

LCMS：

服務簡介

   Thermo ScientificTM Q ExactiveTM 高性能臺式四極桿—軌道阱LC-MS/MS系統，是首臺將四極桿的母離子選擇性和高分辨率精確質量(HR/AM)OrbitrapTM 質量分析相結合的商業化儀器，旨在提供高度可靠的定量和定性(quan/qual)工作流程。

   Q ExactiveTM 質譜儀具有創新的HR/AM QuanfirmationTM 功能，能夠在單次分析中鑒定、定量和確認復雜混合物中更多痕量級的代謝物、污染物、肽類和蛋白質。與其它技術不同的是，該系統能夠在不影響MS/MS靈敏度、質量分辨率或定量重現性的情況下，獲得極其可靠的分析結果。

   Q Exactive高性能臺式四極桿—軌道阱LC-MS/MS系統具有如下意義非凡的創新設計，大大擴展了Thermo Scientific Exactive家族Orbitrap系統的功能：

　　· 集成式四極桿質量過濾器實現前體離子選擇性。在Orbitrap HR/AM檢測之前，MS/MS碎裂過程發生在能量更高的碰撞誘導解離(HCD)池中;

　　· 新型C-Trap離子光學系統和HCD碰撞池提供了快速HCD MS/MS掃描并改善了低質量數離子的傳遞，從而提高靈敏度和定量性能，尤其適用于使用同位素標簽的實驗;

　　· 多重檢測提高了整體系統工作周期的效率，能夠更好的與UHPLC兼容，并在Orbitrap進行同時檢測之前收集并保存多種母離子。

 

服務參數

技術參數：

1. ESI/APCI源；

2. 分辨率：140,000 FWHM( m/z≤200)

3. 質量范圍50-6000m/z

4.高分辨質譜采集速率：最高12Hz

5. 超快速二元高壓泵

6. 二極管陣列檢測器

 

檢測項目

1．藥物分析和藥代動力學研究；
2．環境污染物及其產物分析； 
3．天然產物分析； 
4．未知物結構分析；

5.蛋白分子量測定。

樣品要求

液體1ml以上，固體5mg以上

常見問題及解答

LC-MS樣品如何預處理？

1. 樣品中不得含有強酸、強堿，如含有上述物質，需進行處理，以保證批pH值在2~7.5之間。樣品中不得含有硼氫化鈉，對于加入甲醇后會產生強堿的體系(如有氫鈉)的樣品請務必在送樣前進行處理。 2. 如果體系中含有大量的無機鹽，需要進行處理，以防止無機鹽析出，堵塞分析柱。同時大量的無機鹽存在會污染質譜離子源部分，甚至影響樣品的信號。 3. 如果反應體系中使用了一些質譜信號響應十分強的物質，如：三乙胺，四丁基溴化銨，三苯基氧磷等，送樣前請進行處理，盡量減少此類物質在樣品中的殘留，以避免造成目標物質質譜信號的抑制。 4. 對于應用了金屬類催化劑（如鈀類催化劑）的反應體系時，請務必進行處理后再送樣。這類金屬催化劑往往很容易在LCMS分析體系內殘留，質譜信號非常強，將嚴重影響后面樣品的正常測試。 5. 測試樣品中要盡量避免含有紫外吸收比較強的溶劑，如：苯，甲苯，吡啶等。 6. 對于監控反應的樣品（如反應液或用乙酸乙酯，二氯，三氯萃取后的反應液，過柱用烷烴溶劑等）取適量后用甲醇，乙腈等稀釋到適當濃度。 7. 發貨或純度測定的樣品盡可能的用色譜級的甲醇，乙腈，水溶解；如果這些溶劑的溶解性不好，可用較好溶的溶劑先溶解后再用色譜甲醇，乙腈稀釋到合適的濃度；另外，有些發貨的樣品需要用220nm，可用DMSO或DMF溶樣（發貨樣品盡量避免含有乙酸乙酯，二氯等溶劑），然后再用色譜甲醇，乙腈稀釋到合適的濃度，因為這兩個溶劑的峰保留時間短，不會與樣品峰重疊。發貨樣品送固體的請注明所需溶劑。 8. 被測樣品或樣品中含有劇毒物質或刺激性氣味，請注意，實驗員務必要標示清楚并告知分析員，以便采取防護措施。 9. 樣品必須經過0.22um的過濾器過濾（過濾后樣品必須澄清，無絮狀物），否則不予測試。

送樣量及樣品處理有什么要求嗎？

1. 對于已經純化的樣品，最好去除溶劑，用點樣毛細管沾取少量放入樣品管，并稀釋至0.5mL，用0.22μm的濾器過濾即可。 2. 對于反應體系樣品，如果在薄層上點一下，斑點即很清晰，說明濃度適中，取0.2mL放入樣品樣管，稀釋至0.5mL，用0.22μm的濾器過濾即可。 3. 如果需要點多次才能在薄層上見到，就需要酌情增加。 4. 樣品濃度特別小或特別大的請及時向分析員說明。 反應液需用2ml離心管，切忌使用其它離心管或樣品管。要選擇能完全溶解樣品的溶劑，稀釋處理后的樣品需要澄清。濃度過小或過大要備注說明。

如何判斷樣品是不是可以做LCMS

可以查詢相關文獻，或者樣品相關的檢測信息，一般的化合物，代謝產物，降解產物都是可以測試的。

數據如何解析

我們實驗室有專業的解析老師，需要解析可以跟項目經理聯系，根據不同解析服務進行報價。

LCMS可以進行定量實驗嗎 ？

可以的，需要標準品。LCMS定量比一般的檢測要靈敏。

服務案例

1.  300多種多酚含量組成測定

2. 18種單糖組成測試